神经干细胞
同济大学等成功制备神经干细胞衰老模型
衰老是指随时间推移身体组织的机能下降，经常引起衰老相关的退行性疾病，例如：三篇论文深入了解衰老带来的神经元变化。越来越多证据表明，神经干细胞的衰老，对于中枢神经细胞衰老非常重要。然而，其根本分子机制的阐述却因为缺乏合适的衰老模型而受阻。
2014年3月13日，来自同济大学、南通大学、清华大学和英国谢菲尔德大学的研究人员，在《Nature》属下权威医学生命科学期刊《Cell Death and Disease》发表的一项研究中，成功制备了一种细胞衰老模型，可广泛应用于神经干细胞衰老和老化的分子探索。 文章的通讯作者包括同济大学医学院的梁爱斌、高正良和徐俊。
衰老的特点是成人组织在生理和功能方面的逐渐衰弱，体现在九个共同的特征：基因组不稳定，端粒耗损，表观改变，蛋白质内稳态缺失，营养感应失调，线粒体功能障碍，细胞衰老，干细胞耗损和细胞间通讯改变。在细胞水平上，这些年龄依赖性退化可能是由细胞大分子（包括蛋白质、RNA和DNA）的破坏和侵蚀引起，通常是细胞压力和环境刺激的结果。其中，DNA损伤自然增长和DNA修复不足，通常伴有氧化应激和线粒体功能障碍，是引起细胞衰老和老化的一个主要因素。相反，DNA修复途径可通过保持基因组完整性，来延缓细胞的衰老和老化。人类单基因早衰综合症（monogenic progeroid syndromes）几乎完全由DNA修复基因突变引起，缺乏DNA修复基因也能导致小鼠模型的过早衰老，这最好地说明了DNA损伤控制在衰老过程中的根本重要性。
DNA损伤的积累，也可能是驱动常驻（resident）干细胞衰老和最终衰竭的主要力量。小鼠模型中具有DNA修复途径组分的遗传病变，通过各种机制，能够深刻影响常驻干细胞的完整性。例如，在衰老的造血干细胞（HSCs）中积累的DNA损伤，以及DNA损伤修复途径中的缺陷，可引起HSC不足和造血异常。此外，干细胞中的DNA病变可以将上述两种情况传播给子干细胞（daughter stem cells）和下游血统。因此，干细胞应对DNA损伤的能力，将对干细胞完整性及其后代具有深远的影响。
成人神经干细胞（NSCs）对于大脑内稳态必不可少，但是随着年龄的增长，会出现增殖下降和细胞衰老。增殖降低可增加G0/G1细胞周期阻滞，减少神经元形成，逐渐导致修复和再生能力的缺失，从而引起神经老化和障碍，如嗅觉功能障碍、空间记忆缺失和神经退行性疾病。
各种内在因素能够调节这一功能下降，从而调节大脑的衰老。例如，衰老调控因子（如p16）的年龄依赖性增长，可导致老化NSC库的减少。成年神经发生对环境压力（例如DNA损伤）也很敏感。单剂量的10Gay辐射暴露，可导致持久的认知障碍，DNA双链断裂修复不足可导致早熟的神经发生，最终降低神经元生产。
尽管目前已经取得了这些进展，成人NSGs对DNA损伤响应的分子特性及其功能重要性，在很大程度上还不明确。同样，成人NSCs是否或如何发展代偿机制来对抗过度DNA损伤和衰老造成的灾难性后果，也不明确。
NSCs老化是一个很难研究的课题，一方面是因为体内实验材料的稀缺性和不易操作，另一方面，是由于缺乏适当的模型来调控关键基因，在相对短的时间内检测分子机制。因此，在体外建立NSC衰老模型，对于阐明NSC衰老机制至关重要。羟基脲（Hydroxyurea，HU）最初作为一种抗肿瘤药物，抑制核苷酸还原酶，降低脱氧核苷酸的产量。因此，它可以引发复制叉附近的DNA双链断裂（DSB），对于核和线粒体DNA起着DNA复制抑制剂的作用，引起细胞和线粒体应激及功能障碍。它能诱导不同细胞系的衰老样变化，但是在NSCs中，羟基脲的作用尚不明确。
在目前的研究中，研究人员利用一种已经优化的HU程序，处理产后NSCs，成功制备了一种加速的细胞衰老模型。HU处理不仅诱导不可逆的细胞周期停滞和衰老样形态，而且还引起了衰老相关基因的表达升高，及DNA损伤修复机制的功能障碍。因此，NSCs的增殖能力和神经性分化功能也得以修复。
此外，慢性DNA损伤积累和DNA修复能力下降，伴随着胞内ROS水平升高和细胞凋亡减少而发生。这些结果表明，由HU处理诱导的NSCs细胞培养物的早衰，能够概括体内衰老的关键因素，从而可作为一种有用的衰老模型。进一步的蛋白质组学分析，解开了不同老化特征相关的分子网络，表明本研究中的细胞模型，可以广泛用来解析NSC及神经老化的机制。
本文摘自：生物通
